FAQ
Le coating peut-il être réalisé en avance ? Quelle est la profondeur de champ de PRIMO ? Combien de temps les cellules adhèrent-elles sur les patterns ?… Toutes les réponses à vos questions dans ce FAQ.
Le photopatterning avec PRIMO
COMBIEN DE TEMPS FAUT-IL POUR CRÉER UN PATTERN DE PROTÉINES AVEC LA SOLUTION PRIMO ?
La durée totale de création d’un pattern (hors étape de dessin) varie entre 10 et 15 minutes. La durée d’illumination est variable et doit être optimisée suivant les patterns projetés et l’objectif utilisé. Après cette étape d’illumination UV et dégradation du polymère anti- adhésif, il faut compter environ 5 minutes pour l’adsorption des protéines (durée variable suivant la concentration déposée sur le substrat).
Le module PRIMO
QUELLES SONT LES DIMENSIONS ET LE POIDS DU MODULE PRIMO ?
Les dimensions du boîtier PRIMO 2 (longueur x largeur x hauteur) sont 31 x 24,3 x 7,5 cm. Il pèse 5 kg.
Le logiciel dédié Leonardo
QUELLES SONT LES FONCTIONNALITÉS DU LOGICIEL LEONARDO ?
- Réplication d’un même motif (réglage en lignes et colonnes et réglage de l’espacement)
- Réalignement de motifs successifs ou sur des microstructures (prévisualisation, rotation)
- Gestion des gradients
La plateforme et les réactifs de photopatterning
QUEL EST L’ÉQUIPEMENT NÉCESSAIRE POUR UTILISER PRIMO ?
- Microscope inversé équipé d’un système de maintien de focus(1) :
- Nikon Ti-E et Ti-2
- Leica DMi8
- Olympus IX83
- Zeiss AxioObserver
- Système d’épifluorescence
- Platine motorisée X/Y
- Caméra
- Ordinateur
- Réacteur plasma et pompe dédiée(2)
PRIMO micropatterning for cryo-ET
What difference does it makes to use PRIMO to prepare my cell samples for cryo-ET ?
PRIMO maskless micropatterning system allows to control cell adhesion. Therefore, it guarantees you will get several cells positioned precisely where you want them to be on the EM grid (usually in the middle of the square composing the mesh of the grid).
Futhermore, it gives you full control over the design of micropattern you create. As shown in some of our users research works, you can then control cell shapes, polarity, spreading, and that for:
- mechanobiology studies
- facilitating the FIB milling process
- ensuring reproducible and more efficient cryo-ET imaging