PRIMO

Le micropatterning sur mesure

Contrôlez la chimie et la topographie du microenvironnement cellulaire et étudiez leurs impacts sur le développement des cellules avec une solution inédite de photopatterning quantitatif sans masque et sans contact.


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Contrôlez le microenvironnement cellulaire

Primo a été imaginé pour vous permettre de concevoir et mener toutes les
expériences de micropatterning que vous imaginez, en 2D et aussi en 3D.

Il vous suffit de sélectionner parmi les fichiers de votre ordinateur le motif que vous voulez utiliser (aucune limite de taille ou de forme). PRIMO le projette ensuite sur le support de culture cellulaire et vous permet de créer le pattern avec la protéine de votre choix.

PRIMO
« PRIMO dépasse les limites
de votre créativité »

Pr. Virgile Viasnoff

La technologie de micropatterning PRIMO

Depuis quelques années, l’étude de l’influence du microenvironnement sur les mécanismes intra et intercellulaires est primordiale pour la recherche en biologie cellulaire et médicale.

Parmi les méthodes de contrôle de ce microenvironnement, le «micro-patterning» qui consiste à créer des motifs (ou patterns) de protéines sur lesquels sont cultivés les cellules vivantes est en plein développement. Cependant, les techniques actuelles de micropatterning s’avèrent fastidieuses, complexes et non quantitatives.

Partant de ce constat, les scientifiques d’Alvéole ont développé une technique innovante de photopatterning multi-protéines pour faciliter les manipulations expérimentales des chercheurs.

PRIMO s’appuie sur la technologie LIMAP* (Light Induced Molecular Adsorption of Proteins) et associe un système de photolithographie sans masque et sans contact (PRIMO), contrôlé par un logiciel dédié (Leonardo), et un réactif photo-activable spécifique (PLPP). L’action combinée des UV et du PLPP permet de générer en quelques secondes n’importe quel motif avec plusieurs protéines sur les supports standards de culture cellulaire.

Le Micropatterning facilité

Découvrez les étapes clés du processus de photopatterning avec PRIMO

Dessin du pattern

01

Dessin du pattern

Un fichier image est chargé dans le
logiciel Leonardo qui l’envoie au
module PRIMO.

Illumination UV

02

Illumination UV

PRIMO projette l’image sur le substrat
(lumière UV, λ=375nm). Le pattern
résulte de l’action combinée des UV
et du PLPP (réactif
photo-activable).

Micropatterning

03

Micropatterning
de protéines

Des protéines sont ajoutées
(fibronectine par exemple) et se lient
aux zones illuminées.

Micropatterning

04

Adhérence cellulaire

Des cellules sont ensemencées et
adhèrent uniquement aux
micropatterns de protéines.

Accéder au mécanisme détaillé du micropatterning avec PRIMO, Leonardo et le PLPP sur la page web dédiée au PLPP.

 

Le système de photopatterning PRIMO peut également être utiliser pour créer des substrats microstructurés.

Accéder au processus détaillé de microfabrication avec PRIMO.

Des performances inégalées

Gradients

256

niveaux de gris

Multi-protéines

3

suivant les conditions
expérimentales

Haute résolution

1,2µm

sur tout le champ
d’observation*

*Environ 500×300µm, objectif 20x

Rapide

30sec

pour un motif
en plein champ*

*Environ 500×300µm, objectif 20x

Compatible

substrats
standards

de culture cellulaire**

** Lames, lamelles, boîtes de Petri,
dispositifs 3D, dispositifs de
microfluidique, etc.

Multi-protéines

Multi-protéines

Photopatterning successif de Fibrinogène-A488 en vert et Protéine A-A647 en rouge sur des micropiliers de PDMS microfabriqués avec PRIMO.

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE

Image en microscopie à épifluorescence de points de Protéine A-488 de 1,5 µm espacés de 1,5 µm sur du PDMS.

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE 

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE 

Image en microscopie à épifluorescence de lignes de Protéine A-488 de 2 µm sur du verre.

GRADIENTS

GRADIENTS

Image en microscopie à épifluorescence d’un gradient de Fibrinogène A488 sur une lamelle de verre.

Les avantages

Gain de temps 
& independance

Concevez et réalisez
votre expérience vous-même

Flexibilité

Dessinez, téléchargez et projetez une
nouvelle image selon vos besoins !

Versatilité

Utilisez vos substrats classiques de
culture cellulaire, aucune contrainte

Micropatterning d’une large gamme de protéines

Plus de 10 protéines utilisées quotidiennement par nos utilisateurs, dont les suivantes :
Fibrinogène-488, Fibrinogène-647, Fibronectine, GFP,
Neutravidine-488, Neutravidine-647, PLL-PEG-Biotine, Protéine A-647,
Streptavidine, ainsi que des anticorps primaires et secondaires.

Compatibilité avec tous
les substrats standards

Patterning de protéines :
lames et lamelles de verre, PDMS, gel de polyacrylamide (transfert), polystyrène, matériaux photo-réticulables.

Microfabrication : résine photosensible.

Les applications en biologie cellulaire

« We are working on the generation of 3D cellular microenvironments to reproduce Hematopoietic Niches. PRIMO will be used to generate 3D photo-polymerized microenvironments and to pattern them to localize different cell populations involved in the hematopoiesis. »

« We are currently particularly interested in determining the role of the biophysical environment in the establishment of apico-basal polarity in mammary gland cells and in liver cells. The use of PRIMO in this context proved absolutely essential since it allowed us to create artificial microniches in 3D where we could control up to 150 combinations of environmental cues. »

« Our aim is to develop in vitro experimentation to decipher guiding mechanisms involved in vivo. PRIMO technology is particularly adapted to design in vitro microdevices patterned with controlled patches of the signaling proteins relevant for white blood cell migration. »

« My research focuses on the mechanical aspects of cell division. With the PRIMO system we wanted to control cellular geometry to impose spatial constraints during mitotic progression. »

« We are interested in imaging subcellular localization of certain cell-surface receptors and check whether they colocalize with focal-adhesion complexes. For this purpose, we are interested in making different types of patterns of Fibronectin with subcellular dimensions. »

« My research project aims at unravelling how a T cell switches from a fast migratory state to a stationary state upon activation. To do so, I perform live cell imaging of T cells migrating inside micro-fabricated channels coated with activating molecules. However, with this approach, I do not control when and where a T cell encounters the activating molecules. »

« Protein micropatterning represents an excellent tool to probe the behavior and functions of cellular systems. PRIMO is specially suited for our experiments, in which the cell-substrate interaction needs to be precisely adjusted both throughout the substrates and in time, in order to control the dynamic behaviour of cell monolayers. »

Le centre de Ressources et Support

Notre équipe vous livre toutes ses astuces pour mener à bien vos manipulations expérimentales et aller encore plus loin !

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