In-well printing

Direct in-well printing up to 384-well plate format.

Gentle to cells

405 nm light preserves cell viability

Unmachted Resolution

Achieve patterns with 5 µm resolution

User-friendly

Very easy to use & flexible pattern design

Easy  3-step process

 A straightforward & easy workflow from an idea to results

 Pattern design

Process-1

 Structure polymerization

Process 2

Cell culture

Process-3

Applications

Primo 405: detailed patterns in various hydrogels & precise structures with or without embedded cells.

Without cells

Hydrogel structures of several sizes from 60 µm to 7.5 µm lines Courtesy of LAAS, ©Tessella Biosciences
Hydrogel structures of several sizes from 60 µm to 7.5 µm lines Courtesy of LAAS, ©Tessella Biosciences

With cells

Left figures: Digital patterns used to photopolymerize EPC*-embedded constructs shown immediately after fabrication and after 2 days. Right figurse: Self-organizing photopolymerized EPCs after 7-day culture Mazari-Arrighi et al, 2024

PRIMO bioprinting technology

All-in-one platform easing the system installation!

 

The PRIMO Optical Platform is a ready-to-use integrated optical solution that simplifies access to Primo technology. With pre-integrated optics, users can quickly implement the PRIMO system without the need for a dedicated microscope. Available in two configurations, the platform delivers all PRIMO functionalities allowing bioprinting tailored to the evolving needs of research laboratories.

 

.

UNE PLATEFORME TOUT-EN-UN ADAPTEE A VOS BESOINS

Un nouveau setup permettant d’utiliser PRIMO au meilleur de ses capacités et de faciliter l’installation du système.

Avantages

Petite taille

 

60×60 cm

 

 


à placer facilement sur la paillasse

Modulable

2 configurations disponibles

 

 


selon vos besoins expérimentaux

Optimisée

pour utiliser PRIMO au meilleur de ses
capacités

 

résolution µm, patterning rapide

MICROPATTERNING PRIMO PLATFORMADVANCED  PRIMO PLATFORM
Spécifications
Objectif(s)un objectifdeux objectifs
Platine motorisée
Brightfield
Camera CMOS
Système d’autofocus
Option
Fluorescence widefield
Demandez un devis
ou une démonstration
Vous souhaitez tester PRIMO sur l’un de vos projets d’expérience, recevoir une offre tarifaire ou simplement en savoir plus sur Alvéole et ses produits, notre équipe est à votre écoute pour répondre à vos questions.

Notre équipe de développement applicatif est à votre écoute pour répondre à vos questions et demandes et pour vous fournir plus d’informations sur nos produits !

+33 (0)1 84 25 51 41
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Pour un contrôle optimisé et personnalisé de vos conditions expérimentales, découvrez les produits complémentaires à PRIMO.

 

PRIMO

La bio-ingénierie simplifiée

Le système PRIMO évolue vers une version plus compacte, avec un schéma optique permettant la microscopie en fluorescence, et plus rapide : PRIMO 2. Micropatterning, polymérisation d'hydrogels et microfabrication, le tout dans un seul appareil. Créez des micro-environnements cellulaires in vitro sur mesure et obtenez de meilleurs modèles cellulaires pour vos expériences de biologie cellulaire ou pour l'imagerie en cryo-ET.
Découvrir PRIMO
 

PDMS Stencil

Le support multi-puits

Avec ses multiples puits, le PDMS Stencil réduit les volumes de réactifs utilisés et accueille différentes conditions expérimentales sur un même substrat.
Découvrir le PDMS Stencil
 

REACTIFS PRIMO

La gamme photoactivable

PRIMO est un système de photopatterning à base d'UV qui offre des possibilités variées d'applications, notamment le micropatterning et la structuration d'hydrogels. Notre gamme de produits prend en charge ces deux applications grâce à des réactifs photoactivables. PLPP Classique : permet le micropatterning de substrats de culture cellulaire lorsqu'il est éclairé par PRIMO. PLPP Gel : Accélérez jusqu'à 30 fois la vitesse de vos expériences de micropatterning. HyPE : permet de structurer les hydrogels de manière flexible en 2.5D.
Informations additionnelles sur les réactifs PRIMO
 

LEONARDO 5

Nouvelle version et nouveau concept

Le logiciel LEONARDO a été développé pour contrôler le système PRIMO et optimiser l’utilisation de ses différentes capacités. La nouvelle version LEONARDO 5 est construite sous forme de modules pour améliorer sa facilité d’utilisation et gagner du temps lors des expériences réalisées avec PRIMO : micropatterning, micropatterning d'EM grids, micropatterning de plaques multipuits, structuration d’hydrogels, microfabrication, multi-images projection. Les nouvelles fonctionnalités et les nouveaux modules ont été approuvés et validés par nos utilisateurs.
Découvrir les fonctionnalités de Leonardo

Le centre de Ressources et Support

Notre équipe vous livre toutes ses astuces pour mener à bien vos manipulations expérimentales et aller encore plus loin !

Tutoriels
vidéos

Les publications
de nos utlisateurs

Notes d’applications

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PLPP : micropatterning à haut débit

PRIMO est un système de photopatterning UV, permettant de contrôler la biochimie de vos substrats de culture cellulaire. L’utilisation couplée de PRIMO et du PLPP (Classique ou Gel) permet de réaliser des micropatterns sur vos substrats de culture cellulaire.

Le micropatterning est une technique soustractive. Tout d’abord, recouvrez votre substrat de culture cellulaire habituel d’un polymère anti-adhésif, afin d’empêcher les biomolécules d’y adhérer.
Ensuite, illuminez votre support avec le motif de votre choix, à l’aide de PRIMO* à λ=365nm.

Ajouter le PLPP Classique sur le substrat avant l’illumination permet au polymère anti-adhésif d’être dégradé en quelques secondes, et de  créer de multiples micropatterns.

Ajouter le PLPP Gel sur le substrat avant l’illumination permet d’accélérer l’expérience de micropatterning jusqu’à 30 fois, de façon à créer des centaines de micropattern en seulement quelques minutes.

* Basé sur la technologie LIMAP protégée par deux brevets du CNRS et de l’Université de Bordeaux.

Workflow de micropatterning avec le PLPP (Classique ou Gel) et PRIMO

Utilisation du PLPP Gel avec PRIMO

Spécifications

Photo-initiateur

λ=365nm

Accelerateur

0.5 sec

pour un pattern full field*

*Approx. 500×300µm, objectif 20x, avec PLPP Gel

Compatibilité

tout substrats*

*substrats de culture cellulaire habituels: lamelles de verre, boîte de Petri, plaques multi-puits,…

Temps de Patterning
Pattern Full field (500 x 300 µm), objectif 20x
0.5 sec (pattern blanc)

4 sec (gradient)

Substrats
Verre
PDMS rigide (reticulé): plat ou structuré
PDMS mou: plat ou structuré
Transfert sur gel de polyacrylamide (avec une coverslip)
Puce Microfluidique
Protocoles
Plasma cleaningObligatoireNon-obligatoire
PEG SVA
PLL-G-PEG
Objectif20x seulement20x ou 4x

HyPE: la structuration d’hydrogels en toute simplicité

PRIMO vous permet de modifier la topographie de votre substrat de culture cellulaire. En utilisant PRIMO et le nouveau réactif HyPE, vous pourrez facilement photopolymériser des structures 2.5D en hydrogel.

Ce nouvel activateur de photopolymérisation permet de structurer facilement les hydrogels.

Mélangez directement HyPE avec un hydrogel sensible aux UV (tel que le 4 arm-PEG ou le GelMA). Contrôlez ensuite la hauteur de polymérisation de la structure de l’hydrogel en illuminant la solution avec un motif en niveaux de gris, à l’aide de PRIMO.

HyPE
permet d’obtenir des structures 2.5D telles que des cuvettes, des canaux ou des piliers, utilisées pour les sphéroïdes et les organoïdes, les modèles cellulaires 3D et les structures in situ dans des puces microfluidiques.

Teaser: Utiliser HyPE pour créer des structures 3D

Workflow de structuration d’hydrogel avec HyPE et PRIMO

Spécifications

Contrôle de la hauteur

25 à 800 μm

hauteur de polymérisation

Gamme de produits incluant 4 formules

Polymérisation rapide

4 sec

pour un pattern full field*

*Approx. 2.5×1.5 mm avec un objectif 4x

COMPATIBILITé

GelMA &
4Arm-PEG*

*Validé par notre R&D à ce jour

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PRIMO

La bio-ingénierie simplifiée

Le système PRIMO évolue vers une version plus compacte, avec un schéma optique permettant la microscopie en fluorescence, et plus rapide : PRIMO 2. Micropatterning, polymérisation d'hydrogels et microfabrication, le tout dans un seul appareil. Créez des micro-environnements cellulaires in vitro sur mesure et obtenez de meilleurs modèles cellulaires pour vos expériences de biologie cellulaire ou pour l'imagerie en cryo-ET.
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PDMS Stencil

Le support multi-puits

Avec ses multiples puits, le PDMS Stencil réduit les volumes de réactifs utilisés et accueille différentes conditions expérimentales sur un même substrat.
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LEONARDO 5

Nouvelle version et nouveau concept

Le logiciel LEONARDO a été développé pour contrôler le système PRIMO et optimiser l’utilisation de ses différentes capacités. La nouvelle version LEONARDO 5 est construite sous forme de modules pour améliorer sa facilité d’utilisation et gagner du temps lors des expériences réalisées avec PRIMO : micropatterning, micropatterning d'EM grids, micropatterning de plaques multipuits, structuration d’hydrogels, microfabrication, multi-images projection. Les nouvelles fonctionnalités et les nouveaux modules ont été approuvés et validés par nos utilisateurs.
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PLATEFORME OPTIQUE PRIMO

Une nouvelle PLATEFORME PRIMO avec optiques intégrées est maintenant disponible. Cette plateforme donne accès à PRIMO2 sans avoir besoin d'un microscope dédié. Une plateforme tout-en-un avec deux configurations disponibles: - la MICROPATTERNING PRIMO PLATFORM dédiée au micropatterning - la ADVANCED PRIMO PLATFORM pour toutes les applications de micropatterning, structuration d'hydrogel et microfabrication.  
Informations additionnelles sur les réactifs PRIMO

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Les avantages de LEONARDO 5

LEONARDO 5 rend l’expérience utilisateur optimale et contient de nombreuses nouvelles fonctionnalités.

Il répond aux besoins de l’utilisateur :

  • Interface graphique ergonomique et pratique avec des fonctionnalités automatisées, une utilisation intuitive et des icônes plus claires
  • Step-by-step workflow pour vous guider dans l’utilisation des différents modules
  • Nouveau format de rapport permettant de sauvegarder l’ensemble des informations relatives à votre expérience

De nouvelles fonctionnalités ont été mises en place :

  • Gestion des motorisations du microscope : en plus de la platine xy et de la caméra, LEONARDO est désormais capable de contrôler les switchs des objectifs du microscope. De plus, le z peut être sauvegardé pour assurer une mise au point correcte sur l’échantillon.
  • Des sessions utilisateur pour sauvegarder vos préférences de paramètres expérimentaux pour chaque module (doses, réplications, espacement, niveau de gris, rotation).

Teaser : introduction à LEONARDO 5

Le nouveau concept du logiciel LEONARDO

Choisissez le module approprié pour vos expériences et enregistrez vos paramètres expérimentaux.

Module EM Grids

Structuration d’hydrogels : photopolymérisation d’hydrogels sensibles aux UV en ajustant les paramètres d’illumination (noir et blanc ou niveaux de gris) pour obtenir des structures 3D complexes.

 

Microfabrication: microfabriquez des microchips et des organ-on-chip en chargeant rapidement des fichiers d’images volumineux grâce à un traitement optimisé des fichiers.

 

Projection d’images successives: projection de patterns à la manière d’un film, où des images successives différentes peuvent être affichées avec une durée de projection choisie.

Micropatterning : le module le plus polyvalent avec des fonctionnalités pratiques pour mettre en place rapidement votre expérience de photopatterning sur n’importe quel substrat de culture cellulaire.

 

Micropatterning d’EM Grids: micropatternez une ou plusieurs EM grids d’affilée en sauvegardant la valeur du z, et en utilisant la capacité d’autodétection de la grille pour améliorer votre workflow de cryo-ET.
Selectionnez une zone réduite sur la grille, pour positionner vos cellules micropatternées : au centre pour un meilleur débit de FIB milling throughput ou hors des carrés de grille endommagés.

 

Micropatterning de plaques multipuits: micropatternez vos plaques multipuits, de modèle standard ou customisé. Placez vos patterns dans n’importe quel puits (puits en ligne, en colonne ou encore groupement de puits) et n’importe où à l’intérieur du puits.

Module Micropatterning de plaques multipuits

Compatibilité de LEONARDO 5

micromanager

version 1.4
version 2.0

OS

Windows7 à Windows11

Equipement Microscope

Tout équipement*
intégré sous
µManager

*camera, platine, z motorization, objectifs, fluorescence

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PRIMO

La bio-ingénierie simplifiée

Le système PRIMO évolue vers une version plus compacte, avec un schéma optique permettant la microscopie en fluorescence, et plus rapide : PRIMO 2. Micropatterning, polymérisation d'hydrogels et microfabrication, le tout dans un seul appareil. Créez des micro-environnements cellulaires in vitro sur mesure et obtenez de meilleurs modèles cellulaires pour vos expériences de biologie cellulaire ou pour l'imagerie en cryo-ET.
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PDMS Stencil

Le support multi-puits

Avec ses multiples puits, le PDMS Stencil réduit les volumes de réactifs utilisés et accueille différentes conditions expérimentales sur un même substrat.
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REACTIFS PRIMO

La gamme photoactivable

PRIMO est un système de photopatterning à base d'UV qui offre des possibilités variées d'applications, notamment le micropatterning et la structuration d'hydrogels. Notre gamme de produits prend en charge ces deux applications grâce à des réactifs photoactivables. PLPP Classique : permet le micropatterning de substrats de culture cellulaire lorsqu'il est éclairé par PRIMO. PLPP Gel : Accélérez jusqu'à 30 fois la vitesse de vos expériences de micropatterning. HyPE : permet de structurer les hydrogels de manière flexible en 2.5D.
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PLATEFORME OPTIQUE PRIMO

Une nouvelle PLATEFORME PRIMO avec optiques intégrées est maintenant disponible. Cette plateforme donne accès à PRIMO2 sans avoir besoin d'un microscope dédié. Une plateforme tout-en-un avec deux configurations disponibles: - la MICROPATTERNING PRIMO PLATFORM dédiée au micropatterning - la ADVANCED PRIMO PLATFORM pour toutes les applications de micropatterning, structuration d'hydrogel et microfabrication.  
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Plusieurs puits, plusieurs possibilités

Parce que des travaux de recherche aboutis sont le résultat de nombreux tests et d’optimisations continues, nous avons développé une membrane multi-puits pour vous permettre de multiplier vos conditions expérimentales sur un même substrat et d’économiser vos réactifs.

La finesse et la souplesse du PDMS Stencil permettent une grande facilité d’utilisation et de dépose sur tous les substrats plats (verre, plastique, PDMS).

Plusieurs usages et formats sont disponibles à la vente :
  • Multi-puits
  • Polymérisation d’hydrogels
  • Chambre de flux
  • Maintient de grilles de microscopie électronique

Pour des besoins très spécifiques, nous proposons également la conception de modèles sur mesure.

4 wells

picto PDMS Stencil 4 wells

Ø ext 15 mm,
Ø puits : 4 mm

9 wells

ext: 20×20 mm,
puits : 3×3 mm

Hydrogels

Ø ext 158.5mm

Flow Chamber

picto PDMS Stencil Flow chamber

18×18 mm

EM grid

picto PDMS Stencil EM grid

3 mm

Utilisation du PDMS Stencil en images

1. Soulevez le film protecteur en plastique pour révéler l’un des PDMS Stencils. Retirez le PDMS des puits à l’aide d’une pince.

2. Pincez un coin du PDMS Stencils et retirez-le de la feuille. Nettoyez-le avec de l’éthanol à 70% et séchez-le (avec un flux d’air par exemple).

3. Placez le PDMS Stencils sur un substrat propre (après traitement au plasma si nécessaire) et retirez toutes les bulles d’air en tapotant.

4. Ajoutez vos réactifs dans les différents puits et mener différentes expériences de micropatterning.

Des usages multiples, tout comme vos tests expérimentaux

Confiner

le liquide*

*aucune fuite sur
l’objectif du microscope

Economiser

volume de réactif

utilisé par expérience

Multiplier

les conditions expérimentales

sur un substrat

Localiser

les zones d’expérience

micropatterns en protéines
et cellules

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Pour un contrôle optimisé et personnalisé de vos conditions expérimentales,
découvrez notre offre de produits complémentaires de PRIMO.

 

PRIMO

La bio-ingénierie simplifiée

Le système PRIMO évolue vers une version plus compacte, avec un schéma optique permettant la microscopie en fluorescence, et plus rapide : PRIMO 2. Micropatterning, polymérisation d'hydrogels et microfabrication, le tout dans un seul appareil. Créez des micro-environnements cellulaires in vitro sur mesure et obtenez de meilleurs modèles cellulaires pour vos expériences de biologie cellulaire ou pour l'imagerie en cryo-ET.
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La gamme photoactivable

PRIMO est un système de photopatterning à base d'UV qui offre des possibilités variées d'applications, notamment le micropatterning et la structuration d'hydrogels. Notre gamme de produits prend en charge ces deux applications grâce à des réactifs photoactivables. PLPP Classique : permet le micropatterning de substrats de culture cellulaire lorsqu'il est éclairé par PRIMO. PLPP Gel : Accélérez jusqu'à 30 fois la vitesse de vos expériences de micropatterning. HyPE : permet de structurer les hydrogels de manière flexible en 2.5D.
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LEONARDO 5

Nouvelle version et nouveau concept

Le logiciel LEONARDO a été développé pour contrôler le système PRIMO et optimiser l’utilisation de ses différentes capacités. La nouvelle version LEONARDO 5 est construite sous forme de modules pour améliorer sa facilité d’utilisation et gagner du temps lors des expériences réalisées avec PRIMO : micropatterning, micropatterning d'EM grids, micropatterning de plaques multipuits, structuration d’hydrogels, microfabrication, multi-images projection. Les nouvelles fonctionnalités et les nouveaux modules ont été approuvés et validés par nos utilisateurs.
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PLATEFORME OPTIQUE PRIMO

Une nouvelle PLATEFORME PRIMO avec optiques intégrées est maintenant disponible. Cette plateforme donne accès à PRIMO2 sans avoir besoin d'un microscope dédié. Une plateforme tout-en-un avec deux configurations disponibles: - la MICROPATTERNING PRIMO PLATFORM dédiée au micropatterning - la ADVANCED PRIMO PLATFORM pour toutes les applications de micropatterning, structuration d'hydrogel et microfabrication.  
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Meilleure préparation des échantillons,
Modèles cellulaires in vitro plus fiables.

L’étude de l’influence du microenvironnement sur les mécanismes intracellulaires et intercellulaires est essentielle pour la recherche en biologie cellulaire. Pourtant, malgré les avancées scientifiques et technologiques, les chercheurs sont régulièrement confrontés à de nombreux défis, tels que :

• les problèmes récurrents de reproductibilité,
• la fiabilité en terme de pertinence physiologique,
• mais aussi le degré de facilité de manipulation,
• et l’efficacité.

C’est pourquoi notre équipe de recherche a développé PRIMO: un système de photopatterning capable de créér des microenvironnements cellulaires in vitro ajustés à différentes conditions expérimentales.

Le système PRIMO évolue vers une version plus compacte, avec un schéma optique permettant la fluorescence, et plus rapide : PRIMO 2.

PRIMO
« The fact that we can use the same system to generate multiprotein patterns and even create 3D structures makes it a very powerful setup. « 

Project Leader, Jorge Ferreira, i3S, Portugal

La technologie de bio-ingénierie PRIMO

L’association de 3 produits spécialement conçus pour le prototypage et la production
de micro-environnements in vitro sur-mesure !

Setup PRIMO 2 - PLPP - Leonardo

Développé par l’équipe scientifique d’Alvéole d’après la technologie LIMAP* (Strale P.O. et al, Adv Mater. 2016), le système de photopatterning sans masque PRIMO (dispositif à micro-miroirs, DMD) peut générer in vitro des micro-environnements cellulaires sur-mesure, grâce à 3 techniques: micropatterning, structuration d’hydrogels et microfabrication.

 

Le processus PRIMO pour des modèles cellulaires in vitro optimisés :

  1. SUBSTRAT : sélection et préparation
  2. CREATION DU PATTERN : dessin puis téléchargement dans le logiciel Leonardo
  3. PROJECTION UV VIA PRIMO : micropatterning, microfabrication ou polymérisation d’hydrogels
  4. CONDITIONS EXPERIMENTALES in vitro SUR-MESURE

Micropatterning

Le système de micropatterning PRIMO permet de finement contrôler l’adhésion cellulaire pour imiter les phénotypes in vivo, étudier les mécanismes cellulaires ou isoler les cellules dans des conditions reproductibles pour des tests standardisés.

Microfabrication

Le système PRIMO de photopatterning par DMD peut réaliser une photolithographie en niveaux de gris sur des résines spécifiques pour générer des moules 3D complexes tels que des rampes, des puits convexes ou des puces microfluidiques pour créer des organes sur puce.

Hydrogels

En tant que système de photopatterning, PRIMO peut également polymériser et photo-scissionner les hydrogels les plus couramment utilisés pour la culture cellulaire 3D, la formation de sphéroïdes ou la polymérisation de membranes perméables dans des puces microfluidiques.

Des performances inégalées

Compatible

substrats
standards

de culture cellulaire*

*Plat ou structurés, rigides ou mous : Lames, lamelles, hydrogels, PDMS, dispositifs de microfluidique, etc.

Haute résolution

1,2µm

sur tout le champ
d’observation*

*Environ 500×300µm, objectif 20x

Rapide

0,5sec

pour un motif
en plein champ*

*Environ 500×300µm, objectif 20x, avec le PLPP Gel

Gradients

256

niveaux de gris

Multi-protéines

3

suivant les conditions
expérimentales

Fluorescence

connexion LLG

*La lumière d’excitation sera réfléchie par le DMD et projetée vers la lentille de tube.

Les applications du micropatterning en biologie cellulaire

Loin de se limiter à la mécanobiologie (connue comme l’analyse in vitro des mécanismes intra et intercellulaires sur cellules vivantes), le micropatterning s’avère être un allié précieux pour différents domaines de recherche, tels que la modélisation de maladies, l’immunologie, la toxicologie, et plus récemment pour la cryo-tomographie électonique (cryo-ET).

Cryo-ET cellulaire:
le challenge de l’échantillon parfait

La cryo-tomographie électronique étant une technique de microscopie encore très récente, toutes les étapes du procédé sont régulièrement améliorées par les laboratoires universitaires et également par les sociétés industrielles.

En contrôlant l’adhérence, l’étalement et la forme des cellules, le micropatterning surmonte les problèmes rencontrés à la toute première étape du procédé de cryo-ET, à savoir la qualité des échantillons cellulaires.

 

En savoir plus sur l’utilisation du micropatterning sur grilles de TEM
Cells randomly seeded on the surface of an EM grid
Mouse A9 fibroblast cells (labeled with Alexa Fluor 488 Phalloidin visualizing F-actin in green) irregularly distributed on the surface of an EM grid. Credit: Leica Microsystems
Cells micropatterned in the center of the squares formed by the mesh of an EM grid
Fibroblasts adhering on fibrinogen micropatterns and therefore precisely positioned in the center of the squares composing the mesh of a carbon EM grid. Collaboration between Alvéole and Dr K. Grünewald.
HeLa cells grown on micropatterned TEM grid
HeLa cells grown on micropatterned TEM grid and stained for live cells with calcein-AM (green) and dead cells (Eth-D1, red). © Dr Elizabeth Wright, University of Wisconsin-Madison.

Amélioration de la préparation d’échantillons cellulaires en cryo-ET,
par Alvéole et Leica Microsystems

Notre préoccupation principale chez Alvéole est de développer des solutions innovantes qui répondent à vos besoins d’améliorer la qualité dess modèles cellulaires pour la biologie et la microscopie.

Dans le cas de la cryo-ET, nous partageons cette philosophie d’excellence avec Leica Microsystems. Nous avons donc logiquement uni nos forces et nos produits – PRIMO, le système de cryogénisation EM GP2 de Leica, le système d’imagerie THUNDER EM Cryo CLEM et les solutions additionnelles en cryo CLEM – en un processus optimisé et plus efficace!

 

+ infos sur le THUNDER Imager EM Cryo CLEM de Leica

Workflows optimisés pour la cryo-CLEM et cryo-ET
grâce au micropatterning

En contrôlant précisément l’adhésion cellulaire sur les grilles de TEM, le système de micropatterning sans masque PRIMO permet de surmonter le premier problèmes lié à la préparation de cellules pour la cryo-ET : obtenir des cellules compatible au procédé.

Intégrez le système de micropatterning PRIMO comme première étape aux flux de travail Cryo CLEM de Leica Microsystems et rendez votre processus de préparation d’échantillons cryo-ET encore plus fiable et efficace!

  • Cellules positionnée de façon adéquate et homogène sur les grilles de TEM,
  • EM solutions Identification précise et continue des composants cibles intracellulaires, et transfert des données vers différentes solutions EM
  • Conditions de cryogénisation optimales et maintenues tout au long du processus d’imagerie et du transfert d’échantillons

Workflow intégré pour la cryo-ET de cellules avec rendement optimal

cells micropatterned on EM grid

Micropatterning
adhérence contrôlée

EM grid vitrification for cell cryo-ET

Vitrification

cryo-CLEM with micropatterning

Microscopy Correlative
→ Taux de réussite élevés

cell FIB milling - facilitated with micropatterning

FIB milling
→ Plusieurs cellules

icon cryo-electron tomography on micropatterning cell

Tomographie électronique
→ Plusieurs lamelles

icon cryo-ET protein in cellular context

Protéines en contexte cellulaire

Les avantages

Gain de temps 
& independance

Optimisez rapidement vos conditions expérimentales par vous-même!

Flexibilité

Téléchargez l’image que vous souhaitez pour structurer et / ou fonctionnaliser la surface de votre substrat!

Versatilité

Utilisez vos substrats habituels de
culture cellulaire : plats ou microstructurés, rigides ou mous.

Compatibilité avec tous
les substrats standards

Patterning de protéines : lames et lamelles de verre, plaques 96 puits, grilles pour la microscopie électronique, polystyrène, PDMS, gel de polyacrylamide (transfert), hydrogels.

Structuration d’hydrogels : hydrogels photo-réticulables, PEG Acrylate, Polyacrylamide, Agar, Matrigel.

Microfabrication : résines photosensibles.

Micropatterning d’une large gamme de protéines

Plus de 10 protéines utilisées quotidiennement par nos utilisateurs, dont les suivantes :
Fibrinogène-488, Fibrinogène-647, Fibronectine, GFP,
Neutravidine-488, Neutravidine-647, PLL-PEG-Biotine, Protéine A-647,
Streptavidine, ainsi que des anticorps primaires et secondaires.

Multi-protéines

Multi-protéines

Photopatterning successif de Fibrinogène-A488 en vert et Protéine A-A647 en rouge sur des micropiliers de PDMS microfabriqués avec PRIMO.

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE

Image en microscopie à épifluorescence de points de Protéine A-488 de 1,5 µm espacés de 1,5 µm sur du PDMS.

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE 

HAUTE-RESOLUTION ET COMPATIBLE 

Image en microscopie à épifluorescence de lignes de Protéine A-488 de 2 µm sur du verre.

GRADIENTS

GRADIENTS

Image en microscopie à épifluorescence d’un gradient de Fibrinogène A488 sur une lamelle de verre.

Microsopie en epifluorescence grâce au schéma optique de PRIMO 2

Microsopie en epifluorescence grâce au schéma optique de PRIMO 2

Microscopie par epifluorescence d’un micropattern de protéines grâce au schéma optique de la 2ème génération de module PRIMO.

« My interest is to understand the role of biophysical and topological properties of tissue microenvironments, such as stem cell niches, in modulating cell fate. Thus, the ability to precisely tune and control extracellular cell/organelle shape and geometry in 2D and 3D, is of critical importance. PRIMO has been incredibly useful in this regard! »

« The main interest of the Tardieux’s laboratory and my PhD project is to decipher how forces drive the unique motile and invasive capacities of the single-celled eukaryotic parasite Toxoplasma gondii. I was able to uncover that the parasite glides by coupling polar adhesions and de-adhesion with traction and dragging forces. The PRIMO technique was needed to create composite patterns with a non-adhesive area next to an adhesive one with the crucial request of a sharp demarcation. »

« We are working on the generation of 3D cellular microenvironments to reproduce Hematopoietic Niches. PRIMO will be used to generate 3D photo-polymerized microenvironments and to pattern them to localize different cell populations involved in the hematopoiesis. »

« Our aim is to develop in vitro experimentation to decipher guiding mechanisms involved in vivo. PRIMO technology is particularly adapted to design in vitro microdevices patterned with controlled patches of the signaling proteins relevant for white blood cell migration. »

« We are interested in imaging subcellular localization of certain cell-surface receptors and check whether they colocalize with focal-adhesion complexes. For this purpose, we are interested in making different types of patterns of Fibronectin with subcellular dimensions. »

« My research project aims at unravelling how a T cell switches from a fast migratory state to a stationary state upon activation. To do so, I perform live cell imaging of T cells migrating inside micro-fabricated channels coated with activating molecules. However, with this approach, I do not control when and where a T cell encounters the activating molecules. »

« Protein micropatterning represents an excellent tool to probe the behavior and functions of cellular systems. PRIMO is specially suited for our experiments, in which the cell-substrate interaction needs to be precisely adjusted both throughout the substrates and in time, in order to control the dynamic behaviour of cell monolayers. »

« Our research is at the frontier of soft matter physics and process engineering. More precisely, we develop microfluidic tools to study industrial processes (mixing, flow, drying, filtration, etc.) involving soft matter systems such as polymers or colloids. We use PRIMO to integrate hydrogel membranes in microfluidic devices to mimic ultrafiltration and dialysis processes on the scale of a few nanoliters. »

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Notre équipe vous livre toutes ses astuces pour mener à bien vos manipulations expérimentales et aller encore plus loin !

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PDMS Stencil

Le support multi-puits

Avec ses multiples puits, le PDMS Stencil réduit les volumes de réactifs utilisés et accueille différentes conditions expérimentales sur un même substrat.
Découvrir le PDMS Stencil
 

REACTIFS PRIMO

La gamme photoactivable

PRIMO est un système de photopatterning à base d'UV qui offre des possibilités variées d'applications, notamment le micropatterning et la structuration d'hydrogels. Notre gamme de produits prend en charge ces deux applications grâce à des réactifs photoactivables. PLPP Classique : permet le micropatterning de substrats de culture cellulaire lorsqu'il est éclairé par PRIMO. PLPP Gel : Accélérez jusqu'à 30 fois la vitesse de vos expériences de micropatterning. HyPE : permet de structurer les hydrogels de manière flexible en 2.5D.
Informations additionnelles sur les réactifs PRIMO
 

LEONARDO 5

Nouvelle version et nouveau concept

Le logiciel LEONARDO a été développé pour contrôler le système PRIMO et optimiser l’utilisation de ses différentes capacités. La nouvelle version LEONARDO 5 est construite sous forme de modules pour améliorer sa facilité d’utilisation et gagner du temps lors des expériences réalisées avec PRIMO : micropatterning, micropatterning d'EM grids, micropatterning de plaques multipuits, structuration d’hydrogels, microfabrication, multi-images projection. Les nouvelles fonctionnalités et les nouveaux modules ont été approuvés et validés par nos utilisateurs.
Découvrir les fonctionnalités de Leonardo
 

PLATEFORME OPTIQUE PRIMO

Une nouvelle PLATEFORME PRIMO avec optiques intégrées est maintenant disponible. Cette plateforme donne accès à PRIMO2 sans avoir besoin d'un microscope dédié. Une plateforme tout-en-un avec deux configurations disponibles: - la MICROPATTERNING PRIMO PLATFORM dédiée au micropatterning - la ADVANCED PRIMO PLATFORM pour toutes les applications de micropatterning, structuration d'hydrogel et microfabrication.  
Informations additionnelles sur les réactifs PRIMO
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